In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

[Monstera]

Joooooor, habia escrito un rollo y se ha borrado... Ahora ya no me queda tiempo, ni memoria de repetir... jajaja

Bienvenido Mortajazario, las semillas de Phal duran poco vivas, entre 3 y 6 meses máximo. El cultivo de tejidos in vitro tiene esa dificultad esterilizarlos, es difícil, pero lo será un poco menos si escojes brotes nuevos de plantas que no estén a la intemperie y si puede ser que no los hayas regado directamente.

Arturo ya nos contarás que tal van esos frascos, que vas a sembrar?

Un saludo,

Olivia

[malfurion]

hola creo q ya m habias ayudado en mi tema q no abri ace muxo bueno pss escuxe q se puede hacer cultivo in vitro con un abon balanceado un gramo x litro y pues tengo un abono de orquideas 20-20-20 cres q este podria servir ????

[ruben rivera benitez]

Estas iniciando Arturo te recomiendo consigas un libro que se llama propagación de plantas de hartan tiene un capítulo dedicado a micropropagacion vas a entender muchas cosas te recomiendo no mas del 20% de azúcar y tu fertilizante preferentemente un triple 20 de peter's además de preparar y esterilizar de corrido así es mas difícil que se te contamine tu medio

[malfurion]

esterilizar corrido no entiendo cm asi
cres q asi aya menos posibilidades de q se contamine mi cultivo
y lo del libro de hartan no abra un pdf de ese libro ????

[Arturo Dos]

Hola Ruben,
mientras ponia la foto aqui en el foro, las frascos ya iban - con su tapa,perforada y tapada con una especie de cinta para fijar esparadrapos - en la olla a presión. No estuvieron más tiempo al aire que el estrictamente necesario.
No hice una sequencia de fotos, pues las fotos al principio del hilo de Olivia son muy elocuentes. Ya pondré fotos si hay germinaciön. Lementablemente he visto que el fruto de Phalaenopsis ya se había abierto - o sea que tengo que esterilizar las semillas, algo que no me gusta nada, prefiero sembrar de cápsulas verdes directamente. Esta vez me inclino por el método de la jeringuilla.
Miraré a ver si encuentro el libro que tu me indicas, aunque libros la verdad es que no me faltan. El abono lo utilicé porque lo tenia a mano. No abono mucho las plantas adultas, pero en anteriores siembras me funcionó y espero que esta vez también. El "30% más de azúcar" es referente a la receta de Olivia, en total he usado 50 g de azúcar en un volumen de 1,5 l; o sea una concentración de 3,3%.
No es la primera vez que siembro orquideas, aunque sí es la primera que siembro Phalaenopsis. Las semillas son de un híbrido blanco de flor grande y sin nombre X Phal. lindenii, hay varias cápuslas más de cruces con lindenii, además de Phal. equestris aurea X equestris aurea. Con las próximas varas de la aurea intentaré sacar adelante clones de la amarilla; de semilla puede salir (casi) cualquier cosa.
Además tengo una cápsula de un Dendrobium noid tipo biggibum, que ha sido una polinización espontanea, pues la planta está en el balcón todo el tiempo. Me servirá para hacer unos experimentos...
Saludos

Arturo

[osomeone007]

ola Arturo, el medio que utilizo es Phytamax P-6668.

Saludos

Empezado por Arturo Dos

Lino,

esa caja está de maravilla! Estoy a pñunto de hacerme una, pero sin laminar flow... ¿qué medio usas?

Saludos

Arturo

[osomeone007]

ola, relativamente a la luz "uvC" ella solo estara ligada unos 15 minutos antes de utilizar la cámara estéril, o sea burrifo la camara esteril con hipoclorito de sodio, ligo la "uvC" y la ventilacion durante 15 minutos y depues manos a la obra .
Si tuviera la luz "uvC" ligada durante la siembra correria el riesgo de matar todas las semillas.

saludos


Lino Ferreira
Aveiro
Portugal

Empezado por Mortajazario

Hola, soy nuevo en el foro aunque ya llevo mucho rato leyendo y siguiendo las publicaciones (mas de seis meses con el tema del in vitro). Comencé a leer información sobre el in vitro por la curiosidad de propagar plantas carnívoras y sin querer terminé por acá.

He cuidado orquídeas mexicanas desde hace algunos años y había tenido la oportunidad de recolectar semillas, pero nunca había pasado por mi mente la idea de germinarlas.

Este año repetí las polinizaciones y pude hacerme de semillas de phaleanopsis y de laelia speciosa, y a la espera semillas de P. Vitellina. Construí una cámara estéril mientras esperaba que maduraran las semillas y me puse a hacer algunos experimentos con carnívoras y otras semillas sin mucho éxito.

(Simplemente las semillas germinaban y dejaban de crecer al poco rato por falta de nutrientes, ya que cada planta requiere cierta cantidad de nutrientes-hormonas y la formula para orquídeas no era la idonea) Con los brotes de otras plantas nunca pude; salvia divinorum, potos y un par de orquideas minis, siempre morían quemadas por el método de esterilización (aun no les encuentro el protocolo adecuado de tiempo) o invadidas por hongos. De las minis logré introducir una al frasco sin contaminación, pero a los pocos meses murió por la bajada de temperatura.....


En fin que el cuento del in vitro me llevó a construir un pequeño armario indoor para una planta madre de salvia, con un termostato, temporizadores, humedad media del 65%, ciclos de luz de 18/6 y otras cosas que me han servido para cultivar oncidiums, injertos de cactus y pereskiopsis sin problemas... (La mayoría de este bricolaje extraído o mejorado de ideas del foro u otras partes en Internet-sobre todo de cultura canabica)

Saco este tema a relucir por la cámara estéril que muestra osomeone007 tiene incorporado una luz "V" que puede llegar a ser perjudicial para la retina del ojo humano, si se usan frecuentemente sin el equipo de protección adecuado.

Para los interesados en construir una cámara casera parecida tomar en cuenta que:

La cámara estéril de OSOMEONE parece tener las dos opciones (luz "V" y luz blanca 6500K) Lo cual me parece una excelente idea a tener en cuenta por seguridad y comodidad.

Mañana iniciaré a probar el cultivo de las semillas de orquídea in vitro en distintos medios caseros, todos con azucar, agar y vitaminas: Platano; platano-tomate; platano-tomate-fertilizante (úrico) ; y la ultima utilizando solo un fertilizante foliar con ingredientes parecidos a los del medio basal murashige & skoog tratando de adecuar las cantidades.


Finalmente doy las gracias por tooooda la información de este tema que me ha servido de mucho y espero pronto contribuir con mi experiencia desde México con algunas fotos de mis invitro y algunas dudas o respuestas.

[Mortajazario]

LINO: =) Es bueno encontrar nueva información, no había pasado por mi cabeza que la luz UV también puede causar daño a las diminutas semillas.


OLIVIA: De momento he sembrado las semillas en el medio esterilizado , espero pronto tener resultados. Las semillas de Phaleanopsis tienen apenas un mes de haber salido de la capsula y las he metido a refrigeración desde entonces. Hoy recolecte las semillas de la P vitellina. (lamentablemente la capsula abrió antes de que pudiera hacer la siembra desde la capsula cerrada)

[alansolanodiaz]

Empezado por Mortajazario

LINO: =) Es bueno encontrar nueva información, no había pasado por mi cabeza que la luz UV también puede causar daño a las diminutas semillas.


OLIVIA: De momento he sembrado las semillas en el medio esterilizado , espero pronto tener resultados. Las semillas de Phaleanopsis tienen apenas un mes de haber salido de la capsula y las he metido a refrigeración desde entonces. Hoy recolecte las semillas de la P vitellina. (lamentablemente la capsula abrió antes de que pudiera hacer la siembra desde la capsula cerrada)

Hola mortajazario pues mira, para mi sería mil veces mejor hacer la siembra cuando la cápsula ya abrió que cuando aún está por madurar pues te platico k corte 1 cápsula d Phal a los 6 meses y enseguida hice la siembra y ahorita llevan 2 meses y no han cambiado para nada y creo k todo mi esfuerzo valió ma... Y ahorita hice la prueba com semillas maduras d cápsula abierta y el germinado se vio a los 6 semanas pero sí gustas intentarlo con cápsula verde igual y resulta 1éxito pues la maduración nunca s la misma, hay cápsulas k tardan hasta 9 meses.

[alansolanodiaz]

Olivia, amiga hermosa como estas? Que crees k resultó efectiva mi siembra con 0 hongos pero corte la cápsula a los 6 meses y no estaba madura pues las semillas se veían color madera clara y A 2 meses no ha habido ningún cambio. TQM amiga salu2 a tú bebé.

[Monstera]

Hola Alan, enhorabuena por tus NO hongos, jajaja, es todo un logro. No tiene por que ser que las semillas no están maduras, también puede ser que sean estériles a veces pasa. De todas maneras no deseperes, yo tiré un par de frascos el otro día despues de 6 meses de Tolumnia, por que pensé que ya no germinarían y uno que quedó en un rincón al verlo dos semanas después tiene 3 o 4 protocormos.

A ver si hay más suerte con las otras. Un beso

[ruben rivera benitez]

He tenido la suerte de asistir a varios cursos es mas en febrero asisto a otro y en todos se descarta la luz es mucho riesgo usarla produce cáncer aunque es uno de los desinfectantes mas efectivos la decisión es de cada quien

[Monstera]

Yo lo único que puedo decir a todo el tema del UV, es que viendo el resultado de la lejía, nunca me ha hecho falta.

Un saludo

[dorgordul]

hola por primera vez me estoy aventando hacer un cultivo invitro ya tengo a mis dos orqudieas para cruzar para hacer un hibrido y segun como voy obvservando dia a dia voy en un buen progreso tanto en aceptacion y sin algun riesgo de aborto se me a hecho dificil encontrar el agar, pero ps intentare con grenetina a ver que sale, bueno una pregunta e visto q comentan q antes de cerrar el bote se le hace otra coccion en olla express pero esta es con las semillas o estas ban despues para que el calor no afecte a la semilla por favor quisiera saber

saludos desde el df mexico

[Mortajazario]

Dorgordul:

Holaaa yo tambien soy del DF, el agar agar lo puedes conseguir en el barrio chino que se encuentra cerca del metro bellas artes, caminas unas cuadras y ahí lo consigues en tiras; o hay un lugar también por ahí, cerca de la torre de comunicaciones, donde puedes conseguirlo en polvo desde 100gramos (venden materias primas) a un lado de los almacenes "Anfora" .

Yo he usado el primero a razón de 6 gramos litro, primero lo trituras fino. Ese es importante dejarlo hervir por diez minutos y agitarlo constantemente para que se incorpore homogéneo al agua.

A mi me costó bastante tiempo encontrar el agar a precio tan módico.